O curto ciclo de cultivo e o alto teor de óleos essenciais das plantas de manjericão tornam-nas uma valiosa fonte de matéria-prima para diversas indústrias. No entanto, a produção em larga escala é limitada pela falta de protocolos específicos para avaliar o vigor das sementes, dificultando o fornecimento consistente de sementes de alta qualidade que atendam às demandas dos consumidores. Este estudo investigou a eficácia de um sistema automatizado para análise de plântulas como ferramenta de avaliação do vigor de sementes de manjericão, comparando-o a testes tradicionais. Para tanto, sementes de oito lotes comerciais foram avaliadas em dois experimentos realizados com um intervalo de seis meses, utilizando os seguintes testes: germinação, primeira contagem de germinação, envelhecimento acelerado com solução salina saturada, emergência da raiz primária, tempo médio de germinação, emergência de plântulas, índice de velocidade de emergência e análise computadorizada de imagens de plântulas. Os parâmetros fornecidos pelo sistema permitiram classificar os lotes de sementes de manjericão de forma clara e objetiva com base no vigor, apresentando forte e significativa correlação com os resultados dos testes tradicionais, especialmente entre o índice de vigor e o comprimento das plântulas. A análise digital de plântulas com quatro dias mostrou-se uma técnica rápida e eficiente para avaliação do vigor de sementes de manjericão, com potencial para automação do processo de coleta e análise de dados. (AU)

RNAs não codificantes longos (lncRNAs) têm recebido atenção crescente devido aos seus diversos papéis regulatórios no câncer, inclusive no melanoma, um tipo agressivo de câncer de pele. A plasticidade e a adaptabilidade fenotípica das células do melanoma são fatores cruciais que contribuem para a resistência terapêutica. A identificação de moléculas que desempenham papéis importantes na plasticidade das células do melanoma poderia desvendar alvos terapêuticos novos e mais eficazes. Esta revisão apresenta conceitos atuais de plasticidade celular de melanoma, ilustrando sua fluidez e descartando a noção ultrapassada de transição epitelial-mesenquimal como um processo binário simplista. A ênfase é colocada no papel fundamental dos lncRNAs na orquestração da plasticidade celular, empregando vários mecanismos recentemente elucidados e revelando o seu potencial como alvos promissores para novas estratégias terapêuticas. Os insights sobre os mecanismos moleculares coordenados pelos lncRNAs no melanoma abrem caminho para o desenvolvimento de terapias baseadas em RNA, sendo uma grande promessa para melhorar os resultados do tratamento e oferecendo um vislumbre de uma abordagem mais eficaz para o tratamento do melanoma. (AU)

Este estudo avaliou as relações e a sensibilidade da abundância de genes microbianos desnitrificantes, bem como a atividade das enzimas do solo ¿-glicosidase (GLU) e arilsulfatase (ARYL), para avaliar a qualidade de solos de cana-de-açúcar manejados com vinhaça (V), torta de filtro (FC) e fertilizante mineral (MF). Amostras compostas de solo foram coletadas usando uma abordagem de amostragem sistemática que incluiu duas classes de solo (Latossolo e Argissolo), duas texturas (argilosa e arenosa), três sistemas de manejo (V, V+FC e MF), duas estações de amostragem (chuvosa e seca) e três repetições, totalizando 72 amostras. A análise do carbono orgânico do solo (SOC) e dos macro e micronutrientes diferenciou as amostras de Latossolo e Argissolo em grupos distintos com base no manejo agrícola (R global = 0,554) e mostrou alguma sobreposição com base na textura do solo (R global = 0,369). O número de cópias dos genes nirK, nirS e nosZ I por grama de solo, determinado por PCR quantitativo em tempo real (qPCR) com base no DNA genômico isolado das 72 amostras de solo, foi maior na estação chuvosa em comparação à estação seca (P>0,05). Nenhum dos genes avaliados revelou resposta consistente aos diferentes manejos do solo de cana-de-açúcar, apresentando padrões de resposta específicos para cada classe de solo e textura. No Latossolo, as atividades de GLU e ARYL aumentaram na seguinte ordem: V < MF < V+FC, independentemente da textura do solo (arenoso ou argiloso) e da estação de amostragem. A atividade média das duas enzimas nos tratamentos V+FC e MF foi 1,8 vezes maior no solo arenoso e 3,9 vezes maior no solo argiloso em comparação ao solo manejado com vinhaça. No Argissolo, não foram observadas diferenças significativas entre os tratamentos. As análises estatísticas revelaram correlações negativas (P<0,05) entre o número de cópias dos genes nirK e nosZ I e as atividades da ¿-glicosidase e da arilsulfatase no solo durante ambos os períodos sazonais analisados. O número de cópias desses dois genes microbianos também foi negativamente correlacionado com a matéria orgânica do solo na estação chuvosa. Assim, as indicações da qualidade do solo de cana-de-açúcar com base nas análises enzimáticas foram corroboradas pela menor abundância de genes associados ao processo de desnitrificação. Os achados deste estudo abrem possibilidades para inferir sobre o potencial de emissão de N2O desses solos de cana-de-açúcar com base na atividade da ¿-glicosidase e da arilsulfatase. (AU)

A perda de olhos ocorre convergentemente em vários filos animais como uma adaptação a ambientes escuros. Investigamos a planária de caverna Girardia multidiverticulata (Gm), uma espécie representativa do clado Espiralados, para estudar mecanismos de perda de olhos. Descobrimos que Gm, que foi previamente descrita como uma espécie sem olhos, retém olhos rudimentares e funcionais. Os olhos são mantidos em homeostase e regenerados em planárias adultas por células-tronco, chamadas neoblastos, por meio da especificação de destino como progenitores oculares. O número reduzido de células oculares em planárias de caverna foi associado a uma taxa reduzida de especificação de destino de células-tronco de progenitores oculares durante a homeostase e a regeneração. Por outro lado, a formação homeostática de novas células a partir de progenitores derivados de células-tronco para outros tecidos, incluindo neurônios, faringe e epiderme, foi comparável entre espécies de cavernas e de superfície. Essas descobertas apresentam um novo modo de perda de características evolutivas, com uma mudança na especificação de destino ocular em células-tronco adultas levando à redução do tamanho dos órgãos fotosensoriais. (AU)

Diferentes condições de processamento para produzir emulsões podem modificar a dispersão dos ingredientes, o aspecto visual e a viscosidade, influenciando a eficácia do produto final. Neste estudo, uma emulsão primária de protetor solar foi produzida pelo processo convencional de agitação e, subsequentemente, submetida, separadamente, a métodos complementares de processamento. Um planejamento fatorial Box-Behnken 2³ foi aplicado a cada método complementar de processamento: o Método de Alta Cisalhamento (CP-HS) e o Método de Homogeneização de Alta Pressão (CP-HPH). O presente estudo teve como objetivo investigar a influência desses processos complementares na distribuição do tamanho das partículas (PSD), potencial Zeta, pH, propriedades reológicas, FPS in vitro e fotoestabilidade. No planejamento fatorial do CP-HS, os fatores explorados em três níveis foram a velocidade e o tempo de agitação, enquanto no planejamento do CP-HPH, os fatores variaram em três níveis de pressão e o número de ciclos pelo homogeneizador de alta pressão. Os resultados indicaram que ambos os métodos complementares de processamento influenciaram significativamente (p < 0,05) as características físico-químicas da emulsão primária de protetor solar, que foi utilizada como ponto de partida. No CP-HS, a amostra submetida a 15.000 rpm por 15 minutos exibiu o maior FPS in vitro (p < 0,05), com um valor médio de 42 no T0, enquanto a emulsão primária de protetor solar teve um FPS de 30. No CP-HPH, observou-se uma redução mais pronunciada e uniformidade na PSD entre os métodos estudados (p < 0,05), com uma faixa de dados de 0,20 - 0,34 ¼m. Esses resultados enfatizam como diferentes métodos de processamento podem influenciar as características finais de uma emulsão, onde escolhas adequadas podem beneficiar significativamente o produto. (AU)

Avaliamos a prevalência de variantes germinativas patogênicas/provavelmente patogênicas (PGV) em pacientes brasileiros com adenocarcinoma pancreático (CP), que representam uma população multiétnica, em um estudo transversal. Incluímos 192 pacientes com CP não selecionados para histórico familiar de câncer. Avaliamos um painel de 113 genes de câncer, por meio de sequenciamento de DNA genômico e 46 marcadores informativos de ancestralidade, por meio de PCR multiplex. A idade mediana foi de 61 anos; 63,5% dos pacientes apresentavam estágios clínicos III ou IV da doença; 8,3% relataram histórico pessoal de câncer; 4,7% e 16,1% relataram parentes de primeiro grau com CP ou câncer de mama e/ou próstata, respectivamente. Embora o componente genético da ancestralidade fosse principalmente europeu, houve considerável miscigenação na composição genética. Doze pacientes (6,25%) eram portadores de PGV em genes de predisposição ao PC (ATM, BRCA1, BRCA2, CDKN2A, MSH2, PALB2) e outros 25 (13,0%) eram portadores de PGV em genes com associação limitada ou não previamente associados ao PC (ACD, BLM, BRIP1, CHEK2, ERCC4, FANCA, FANCE, FANCM, GALNT12, MITF, MRE11, MUTYH, POLE, RAD51B, RAD51C, RECQL4, SDHA, TERF2IP). Os genes mais frequentemente afetados foram CHEK2, ATM e FANC. Em amostras de tumor de portadores de PGV em ACD, BRIP1, MRE11, POLE, SDHA, TERF2IP, realizamos o sequenciamento de exoma, sendo que a principal assinatura mutacional de substituições de base única (SBS) foi SBS1+5+18, provavelmente associada à idade, tabagismo e espécies reativas de oxigênio, que estão associadas ao desenvolvimento do câncer de pâncreas. A assinatura SBS3 associada à deficiência de reparo homólogo também encontrava-se representada, mas em menor escala. Não houve diferença na frequência de portadores de PGV entre: a) pacientes com ou sem parentes de primeiro grau com câncer; e b) pacientes com ancestralidade miscigenada versus aqueles com ancestralidade predominantemente europeia. Além disso, não houve diferença na sobrevida global entre portadores de PGV e não portadores. Portanto, o teste genético deve ser oferecido a todos os pacientes brasileiros com câncer de pâncreas, independentemente de sua ancestralidade. Genes com associações limitadas ou previamente não reconhecidas com câncer de pâncreas devem ser investigados mais profundamente para esclarecer seu papel no risco de câncer. (AU)

Neste artigo, analisamos os efeitos da amostragem aleatória em redes de difusão adaptativas. Essas redes consistem em um conjunto de nós que podem medir e processar dados, e que podem se comunicar entre si com um objetivo comum de estimar um sistema desconhecido. Em particular, consideramos em nossa análise teórica o algoritmo LMS difuso (diffusion least-mean-squares) em um cenário em que os nós são amostrados aleatoriamente. Assim, cada nó pode ou não adaptar sua estimativa local em uma determinada iteração. Nosso modelo mostra que uma redução na probabilidade de amostragem leva a uma deterioração notável na taxa de convergência e, se os nós cooperarem, pode ocorrer uma leve diminuição no desvio quadrático médio da rede (network mean-square deviation - NMSD) em regime permanente, assumindo que o ambiente é estacionário e que todos os outros parâmetros do algoritmo são mantidos fixos. Além disso, também investigamos os efeitos da amostragem aleatória de nós na estabilidade da rede. (AU)

Para entender melhor o impacto da deficiência do gene regulador autoimune (Aire) durante a adesão de células epiteliais medulares do timo (mTECs) aos timócitos, sequenciamos bibliotecas unicelulares (scRNA-seq) obtidas de Aire selvagem (WT) (Aire wt/wt) ou mTECs deficientes em Aire (Aire wt/mut) cocultivados com timócitos WT simples positivos CD4+. Embora as bibliotecas diferissem em seus perfis de mRNAs e lncRNAs, indicando que as mTECs eram heterogêneas em termos de seu transcriptoma, o agrupamento UMAP revelou que ambas as linhagens de mTEC expressaram seus marcadores específicos, ou seja, Epcam, Itgb4, Itga6 e Casp3 em mTECs em repouso e Ccna2, Pbk e Birc5 em mTECs proliferativas. Ambos os timócitos SP CD4+ cocultivados permaneceram em um agrupamento homogêneo expressando os marcadores Il7r e Ccr7. Comparações dos dois tipos de coculturas revelaram a expressão diferencial de mRNAs que codificam fatores de transcrição (Zfpm2, Satb1 e Lef1), genes de adesão celular (Itgb1) em mTECs e Themis em timócitos, que está associado à regulação de sinais de seleção positiva e negativa. Na resolução de sequenciamento unicelular, observamos que Aire atua tanto em mTECs Aire WT quanto Aire deficientes como um controlador upstream de mRNAs, que codificam fatores de transcrição ou proteínas de adesão que, por sua vez, são controladas pós-transcricionalmente por lncRNAs, por exemplo, Neat1, Malat1, Pvt1 e Dancr, entre outros. Na deficiência de Aire, as mTECs desregulam a expressão dos marcadores proteicos MHC-II, CD80 e CD326 (EPCAM), bem como os mRNAs relacionados ao metabolismo e ao ciclo celular, que atrasam a progressão do ciclo celular. Além disso, quando aderidos as mTECs, os timocitos WT SP CD4+ ou CD8+ modulam a expressão de proteínas de ativação celular, incluindo CD28 e CD152/CTLA4, e a expressão de mRNAs de metabolismo celular. Estas descobertas indicam um mecanismo complexo através do qual um desequilíbrio na expressão de Aire pode afetar mTECs e timócitos durante a adesão. (AU)

O diabetes mellitus está associado a alterações na morfologia intestinal e no sistema nervoso entérico. Anteriormente, relatamos constipação em ratos Goto-Kakizaki (GK), um modelo não obeso de diabetes mellitus tipo 2. Objetivo: A análise morfoquantitativa dos neurônios do plexo mioentérico no intestino delgado e grosso de ratos GK machos de 120 dias foi investigada. Métodos: O diabetes foi confirmado por altos níveis de glicemia em jejum. O plexo mioentérico foi avaliado por imunofluorescência de montagens totais. As análises morfoquantitativas incluíram a avaliação da densidade neuronal (neurônios por gânglio) da população neuronal total, das subpopulações colinérgicas e nitrérgicas, e das células gliais entéricas por gânglio. A área do corpo celular de 100 neurônios por segmento por animal foi medida. Resultados: A população total de neurônios e a subpopulação nitrérgica estavam inalteradas nos intestinos delgado e grosso dos ratos GK. A subpopulação colinérgica apresentou diminuição da densidade nos três segmentos do intestino delgado e aumento no número no cólon proximal dos ratos GK. O número de células gliais entéricas aumentou no íleo dos ratos GK, o que poderia indicar gliose entérica causada pelo estado inflamatório intestinal. A área do corpo celular aumentou na população neuronal total do jejuno e do íleo dos ratos GK. Histogramas de frequência da distribuição da área do corpo celular revelaram a contribuição dos neurônios colinérgicos para áreas maiores no jejuno e dos neurônios nitrérgicos no íleo. Conclusão: A constipação relatada anteriormente nos ratos GK pode ser explicada pela diminuição da densidade de neurônios colinérgicos no intestino delgado deste modelo animal. (AU)

Introdução: Pessoas imunocomprometidas apresentam alto risco de infecção persistente pelo vírus do papiloma humano (HPV) e doenças associadas. Poucos estudos avaliaram vacinas de HPV em pessoas imunocomprometidas. Este estudo teve como objetivo avaliar a imunogenicidade e a segurança da vacina quadrivalente contra o HPV (HPV4v) em mulheres transplantadas de órgãos sólidos (SOT), em comparação com mulheres imunocompetentes (IC).Métodos: Ensaio clínico aberto que incluiu transplantadas de órgãos sólidos e mulheres imunocompetentes com idades entre 18 e 45 anos. Todas as participantes receberam três doses da vacina HPV4v. Amostras de sangue foram coletadas para avaliação da respostas imune no início do estudo e um mês após a terceira dose da vacina. As taxas de soroconversão e a concentração média geométrica (GMC) de anticorpos contra o HPV 6, 11, 16, 18, 31, 35, 52 e 58 foram avaliadas por ensaio sorológico multiplexado (tecnologia xMAP). Foi feita avaliação dos eventos adversos (EAs) locais e sistêmicos nos sete dias após cada dose da vacina. EAs graves foram avaliados ao longo de todo o estudo.Resultados: 125 transplantadas (SOT) e 132 mulheres imunocompetentes foram incluídas; 105 (84%) SOT e 119 (90%)] mulheres imunocompetentes completaram o estudo. Antes da vacinação, a soropositividade para HPV não foi significativamente diferente entre os grupos. As taxas de soroconversão foram significativamente menores em SOT (HPV18, 57%; HPV6 e 16, 69%; e HPV11, 72%) do que em mulheres imunocompetentes (100% de soroconversão para todos os tipos de HPV vacinais) (p<0,001). Os GMCs de anticorpos de todos os quatro tipos de HPV vacinal também foram significativamente menores em SOT (p<0,001). Dor no local da injeção e dor de cabeça foram os eventos adversos mais frequentes em ambos os grupos. Dor local foi mais frequente em mulheres imunocompetentes do que em receptoras de SOT. As taxas de outros EAs foram comparáveis ¿¿em ambos os grupos.Conclusões: A vacina HPV4v foi bem tolerada por mulheres transplantadas. Encontramos fortes evidências de menor resposta imune humoral à vacina HPV4v nas transplantadas em comparação com mulheres imunocompetentes, o que fortalece a recomendação de triagem de rotina para câncer cervical em receptoras de SOT, independentemente do status de vacinação contra HPV. (AU)